一、分析方案

基于Aglient 7890A/5975C氣質聯用分析平臺，已成功開發出了可靠的分析方法，能同時提供7種SCFA的定性和定量分析，其中包括乙酸、丙酸、丁酸、異丁酸、戊酸、異戊酸、已酸。至今，我公司已合作了幾十例SCFAs靶向代謝組學分析項目，積累了豐富的檢測分析經驗。
1.1 方法建立
標準溶液--預處理--線性--精密度檢測限

1.2 樣本分析
樣本--提取及預處理--檢測--定性定量分析


二、方法及步驟簡述

1、樣品提取

     稱取適量樣品，加入4mL的甲醇/CH2Cl2（1:3）混合溶液，搖勻；恒溫在30℃以下超聲抽提10min。取出離心管，放于離心機中離心（1800rpm，10min），收集上清液，重復3次；將萃取液在柔和氮氣流下吹干。

2、萃取液的皂化

     加入3mL 6%KOH的甲醇溶液（配制：6gKOH/甲醇118mL左右），超聲10min，放置30min，重復3次，室溫放置過夜（瓶蓋蓋緊）進行堿水解；加入2mL正己烷，超聲10min，搖勻，震蕩離心，棄除上層正己烷萃取液，重復3次。在上述萃取完剩下的溶液中（水相），加入約1mL 4N的HCl使pH<2，再用2mL正己烷萃取3次。

3、脂肪酸的衍生化

     將上述萃取液，轉移到帶蓋玻璃管中，用氮氣吹干后，加入約2mL BF3-MeOH，玻璃管上空間沖入氮氣后蓋蓋密閉，于90℃下加熱2h；待樣品冷卻后，加入5%NaCl溶液約1ml，用2ml正己烷萃取3次，并將萃取液轉移到2mL進樣瓶中，氮氣吹干，待分析。

4、色譜條件

色譜柱：Thermo  TG-5MS 30m x 0.25mm x 0.25μm

升溫程序：80度起始溫度，保持1分鐘；10度/min升溫到200度，5度/min升溫到225度，2度/min升溫到250度，保持5min。

MS，EI源，

分流模式：不分流

scan模式

傳輸線溫度：280℃ 離子源溫度：280℃ 進樣口溫度：290℃ 氦氣，恒流模式，流速：1 .2mL/min。 掃描范圍：30-400 進樣量：1μL。 檢出限：0.02mg/kg

三、案例解析

該研究對大鼠糞便6種SCFA進行了定性定量分析，從結果可以看出，6種SCFA在8 min內同時被檢測，分離度及峰型良好，通過對線性、精密度、定量限等參數的考察，得出本次實驗方法滿足分析要求，結果可靠。